Metoda barwienia MGG (May-Grunwald–Giemsa) to klasyczna technika różnicująca, stosowana głównie w hematologii i cytologii. Poniżej znajduje się szczegółowa instrukcja wykonania barwienia oraz interpretacja wyników.
Etapy barwienia
- Zanurzyć preparaty w roztworze May-Grunwalda na 5 minut.
- Przenieść koszyk z preparatami do naczynia z buforem pH 7,2 na 1 minutę, bez poruszania.
- Zanurzyć preparaty w roztworze roboczym Giemsy i barwić przez 15–20 minut.
- Przenieść preparaty ponownie do buforu pH 7,2 na około 30 sekund.
- Wypłukać preparaty w dejonizowanej wodzie, poruszając statywem przez około 30 sekund.
- Wysuszyć preparaty w pozycji poziomej lub pionowej.
W przypadku starszego roztworu Giemsy (używanego przez kilka dni), zaleca się wydłużenie czasu barwienia do 20 minut.
Wynik barwienia (bufor pH 6,8)
| Rodzaj komórki | Wygląd po barwieniu (metoda Pappenheima) |
|---|---|
| Jądro komórkowe | Czerwone do fioletowego |
| Limfocyty | Cytoplazma niebieska |
| Monocyty | Cytoplazma szaroniebieska |
| Granulocyty obojętnochłonne | Ziarnistość jasno fioletowa |
| Granulocyty eozynofilne | Ziarnistość ceglastoczerwona do ciemnofioletowej |
| Granulocyty zasadochłonne | Ziarnistość ciemnofioletowa do czarnej |
| Trombocyty (płytki krwi) | Fioletowe |
| Erytrocyty | Czerwonawe |
| Pasożyty krwi (np. Plasmodium) | Widoczne wewnątrz erytrocytów jako zabarwione struktury |
Przygotowanie roztworu roboczego Giemsy
- Barwnik Giemsy (nr kat. 98.019) należy rozcieńczyć 1:9 z:
- Buforem pH 6,8 (nr kat. 98.004.R5) lub
- Buforem pH 7,2 (nr kat. 98.022.R5)
Roztwór roboczy można przechowywać kilka dni. W przypadku zbyt słabego wybarwienia – dodać około 1% objętości barwnika stężonego, aby go wzmocnić.
Uwagi techniczne
- Do procedur specjalistycznych należy stosować wyłącznie barwnik May-Grunwalda zmodyfikowany (nr kat. 98.009).
- Zaleca się nie poruszać koszyka z preparatami podczas kontaktu z buforem – pozwala to na równomierne barwienie.
- Czas barwienia można dostosować w zależności od wieku roztworu i pożądanej intensywności barwy.
