Procedura barwienia metodą May-Grunwald–Giemsa

Metoda barwienia MGG (May-Grunwald–Giemsa) to klasyczna technika różnicująca, stosowana głównie w hematologii i cytologii. Poniżej znajduje się szczegółowa instrukcja wykonania barwienia oraz interpretacja wyników.


Etapy barwienia

  1. Zanurzyć preparaty w roztworze May-Grunwalda na 5 minut.
  2. Przenieść koszyk z preparatami do naczynia z buforem pH 7,2 na 1 minutę, bez poruszania.
  3. Zanurzyć preparaty w roztworze roboczym Giemsy i barwić przez 15–20 minut.
  4. Przenieść preparaty ponownie do buforu pH 7,2 na około 30 sekund.
  5. Wypłukać preparaty w dejonizowanej wodzie, poruszając statywem przez około 30 sekund.
  6. Wysuszyć preparaty w pozycji poziomej lub pionowej.

W przypadku starszego roztworu Giemsy (używanego przez kilka dni), zaleca się wydłużenie czasu barwienia do 20 minut.


Wynik barwienia (bufor pH 6,8)

Rodzaj komórkiWygląd po barwieniu (metoda Pappenheima)
Jądro komórkoweCzerwone do fioletowego
LimfocytyCytoplazma niebieska
MonocytyCytoplazma szaroniebieska
Granulocyty obojętnochłonneZiarnistość jasno fioletowa
Granulocyty eozynofilneZiarnistość ceglastoczerwona do ciemnofioletowej
Granulocyty zasadochłonneZiarnistość ciemnofioletowa do czarnej
Trombocyty (płytki krwi)Fioletowe
ErytrocytyCzerwonawe
Pasożyty krwi (np. Plasmodium)Widoczne wewnątrz erytrocytów jako zabarwione struktury

Przygotowanie roztworu roboczego Giemsy

  • Barwnik Giemsy (nr kat. 98.019) należy rozcieńczyć 1:9 z:
    • Buforem pH 6,8 (nr kat. 98.004.R5) lub
    • Buforem pH 7,2 (nr kat. 98.022.R5)

Roztwór roboczy można przechowywać kilka dni. W przypadku zbyt słabego wybarwienia – dodać około 1% objętości barwnika stężonego, aby go wzmocnić.


Uwagi techniczne

  • Do procedur specjalistycznych należy stosować wyłącznie barwnik May-Grunwalda zmodyfikowany (nr kat. 98.009).
  • Zaleca się nie poruszać koszyka z preparatami podczas kontaktu z buforem – pozwala to na równomierne barwienie.
  • Czas barwienia można dostosować w zależności od wieku roztworu i pożądanej intensywności barwy.